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    WorkBeads離子交換層析填料---總有一款能帶給你驚喜!

    版權所有,轉載請聯系基因市場部
    2020-12-15

    離子交換層析,主要依據電荷間的相互作用,通過帶電的溶質分子與介質中可交換的離子進行交換,從而達到分離純化的目的。雖然不如親和層析來得那么方便和簡單,但無疑是生物大分子純化過程中應用最廣泛的一種純化技術,無論蛋白質,多肽還是核酸都可以通過陰陽離子層析進行分離純化;該方法可以分離只有微小電荷差異的不同分子,使得離子交換層析可以應用于從樣本獲取,中度純化到精純的整個純化工藝中;同時離子交換層析可以滿足實驗室少量樣本的純化分析也可以滿足中試、工業生產級別樣本的分離純化。
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    從科學研究到規模生產,基于瓊脂糖的基質已成功用于生物技術純化數十年,這是因為它們與包括蛋白質,肽,核酸和碳水化合物在內的生物分子具有優異的相容性。WorkBeadTM瓊脂糖純化填料使用特有的方法生產,可產生具有緊密尺寸分布和出色機械穩定性的多孔剛性珠,優化的孔隙率使得純化產物的產量和純度達到良好的平衡。

    應用1 

    陰離子交換層析填料用于寡核苷酸的純化

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    通過固相合成生產的寡核苷酸制劑通常需要純化以去除不完整或錯誤的序列。在寡核苷酸中,總是存在小部分的序列,具有堿基的缺失或插入(例如,N-1或N + 1,N是靶寡核苷酸的長度)。失敗的頻率隨著合成寡核苷酸的長度而增加。N-1污染物通常很難從全長寡核苷酸中分離出來。

    由于陰離子交換層析可以基于長度分離帶負電的寡核苷酸,因此它是寡核苷酸純化的常用方法。核酸主鏈中帶負電荷的磷酸基團通過AIEX樹脂上的帶正電荷的基團與樹脂結合。通常,結合強度隨靶序列的長度而增加??梢酝ㄟ^增加鹽濃度梯度來完成吸附的寡核苷酸的洗脫。

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    WorkBeads 40Q 

    高載量強陰離子交換層析樹脂

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    應用2 

    陽離子交換層析填料用于多肽的純化

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    治療性多肽可通過固相合成或在生物學模型系統中表達,但無論哪種方式生產的粗肽產物,均會產生大量工藝相關的雜質(例如失效序列,化學修飾,生物負荷等),需要在下游工藝中去除。當前,反相色譜(Reversed-phase chromatography,RPC)是最常用的多肽純化技術,但原始料液可能會污染色譜柱。如果在基于硅膠的高性能RPC步驟的上游引入陽離子交換層析步驟,則可大大減少雜質的負擔,另外也可使目標肽的純度大大提高。

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    WorkBeads 40S

    高載量陽離子交換層析樹脂

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    應用3 

    復合模式填料用于抗體純化的預處理步驟

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    純化單抗或其他IgG分子時改變層析步驟順序,從傳統的Capture-Enhance-Polish(CEP)策略轉變為Enhance-Capture-Polish (ECP)策略,對進入捕獲柱(Protein A親和柱)的料液進行標準化,預先去除大量的HCP和HCD,從而可以避免大量的生物負荷進入Protein A柱,也可以從一定程度上提高A柱的結合載量。在這種新的ECP策略中,就使用了復合模式填料WorkBeads 40TREN,它允許等滲細胞上清液無需稀釋即可直接上樣。在大多數情況下抗體分子等電點高于pH 7.4,因此會直接流穿而不與填料結合,同時幾乎所有的HCD和大多數的HCP都將與之結合(減少95%)而快速去除。

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    WorkBeads 40Tren 

    耐高鹽復合模式填料

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    基因有限公司獨家合作的Bio-Works是一家專注于生產純化填料的專業公司,其研發與制造總部位于以生產瓊脂糖填料而聞名的瑞典烏普薩拉商業園區,在純化領域有非常獨到的專利技術和產品。Bio-Works基于瓊脂糖的高性能產品既可用于生命科學研究階段的生物大分子純化,也可用于大規模生產生物制藥和診斷產品的商業用途,產品應用集中在抗體純化、蛋白/多肽、寡核苷酸、疫苗等藥物純化領域。

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